郁李仁有效期研究

我国加入WTO后，中药（特指药材及传统饮片）走向世界的机会更多，因此，中药的科学化、规范化、标准化是迫切需要解决的问题，中药有效期研究是要解决的问题之一。

在众多中药中，有的稳定性相对较差，如贮存保管不当而易走油（又称“泛油”。是指药物中所含挥发油、油脂、糖类等因受热或受潮而在其表面出现油状物质或返软、发粘、颜色变浑，发出油败气味等现象）或变色（即中药固有的颜色发生改变）。中药固有的色泽是药材品质的重要标志之一，如颜色变深、变浅或走油都说明某些化学成分的含量发生了变化，质量已经改变。这类中药的合理贮存是保证其品质的关键。因此，进行此类中药的有效期研究与预测，对保障中药质量、人民用药安全具有重要的意义。

药品（包括中药材、中药饮片、中成药等11类）的有效期是指药品在规定的贮存条件下保持质量的期限。《药品管理法》第四十九条规定，未标明有效期或更改有效期的药品，按劣药论处。《药品说明书和标签管理规定》^[3]第十七、十八条规定药品的内、外标签和说明书均应注明有效期。然而标明及研究中药有效期的（除菊花和苦杏仁的类似报道外）还并不多见，因此，进行中药有效期的研究有法可依、势在必行。

郁李仁为蔷薇科植物欧李Prunus humiLis Bge.、郁李Prunus japonica Thunb.或长柄扁桃Prunus peduncuLata Maxim.的干燥成熟种子。前二种习称“小李仁”，后种习称“大李仁”。均主含苦杏仁苷(amygdaLin)。药理研究证明苦杏仁苷为郁李仁的有效成分之一。

通过经典恒温加速和留样观察实验，测定各温度各时间段苦杏仁苷的含量，计算出各温度的速度常数，推算出贮存温度下的速度常数，从而计算出苦杏仁苷的有效期。

1 仪器与材料

1.1 仪器  超声波清洗器（昆山市淀山湖检测仪器厂）、万分之一电子分析天平（沈阳龙腾电子称量仪器有限公司）、电热恒温箱（上海跃进医疗器械厂）。

1.2 材料

1.2.1 试剂  水为注射用水；自制AgNO₃滴定液（0.1046moL/L；0.1moL/L相当于91.48mg的苦杏仁苷)；其余所用试剂均为分析纯。

1.2.2 供试品  郁/小李仁为河北产，批号为20021115，净选。

2 方法和结果

2.1 苦杏仁苷测定  照《中国药典》郁李仁项下【含量测定】方法测定。结果见表1(0时间)。

2.2 经典恒温实验

2.2.1 水分  照《中国药典》附录Ⅸ H水分测定法第一法（烘干法）测定。

2.2.2 样品制备  取供试品48份，每份约50g，用普通塑袋(熔点在120℃左右^[8])包装封口。选择4个温度级、4个间隔时间（见表1），置电热恒温箱中保存，达到规定的时间后取出，粉碎成粗粉（过二号筛）备用。

2.2.3 方法与结果  取2.2.2项样品适量，照2.1项下测定，结果见表1。

表1  经典恒温实验各温度下苦杏仁苷含量与时间的关系

温度/℃	时间/h	取样量/g	含水量/%	AgNO3用量/mL	苦杏仁苷含量与浓度				回归结果※
					含量%	均含量/%	相对浓度%	对数浓度
19/当时室温	0	20.8075	6.90	5.6	2.58	2.60	100.00	2.000	r=-0.9960 a=1.999 b=9.125x10-5
		20.5173		5.6	2.61
		20.6993		5.62	2.6
40	80	21.3051	6.79	5.6	2.52	2.54	97.78	1.990
		21.5468		5.76	2.56
		21.4266		5.71	2.55
	160	20.2652	6.75	5.4	2.55	2.51	96.59	1.985
		20.6111		5.32	2.47
		20.5921		5.38	2.5
	240	21.5767	6.63	5.61	2.49	2.46	94.90	1.977
		21.5766		5.48	2.43
		21.5008		5.55	2.47
	320	21.1982	6.60	5.38	2.43	2.43	93.36	1.970
		21.249		5.4	2.43
		21.431		5.42	2.42
50	40	21.5629	6.81	5.73	2.53	2.53	97.42	1.989	r=-0.9994 a=1.9996 b=-2.600x10-4
		20.1155		5.3	2.52
		21.2096		5.63	2.54
	80	21.8646	6.74	5.64	2.47	2.47	95.05	1.978
		23.7671		6.14	2.47
		22.1716		5.7	2.46
	120	20.5253	6.70	5.2	2.42	2.42	93.07	1.969
		20.1551		5.08	2.41
		21.0278		5.34	2.43
	160	21.6843	6.67	5.35	2.36	2.36	90.74	1.958
		21.6427		5.34	2.36
		21.8427		5.41	2.37
60	20	20.5797	6.72	5.27	2.45	2.46	94.62	1.976	r=-0.9930 a=1.999 b=-9.250×10-4
		20.9495		5.39	2.46
		21.2296		5.48	2.47
	40	22.8856	6.70	5.65	2.36	2.36	90.74	1.958
		21.5444		5.29	2.35
		21.9638		5.44	2.37
	60	21.7967	6.66	5.24	2.3	2.3	88.45	1.947
		21.0007		5.03	2.29
		21.0845		5.09	2.31
	80	21.9948	6.49	5.02	2.18	2.18	83.64	1.922
		20.4324		4.65	2.18
		22.5894		5.17	2.19
70	10	21.1651	6.78	5.35	2.42	2.43	93.53	1.971	r=-0.9972 a=1.998 b=-2.640×10-3
		20.9759		5.33	2.43
		21.2553		5.42	2.44
	20	23.5886	6.64	5.6	2.27	2.27	87.23	1.941
		20.1313		4.75	2.26
		21.8236		5.2	2.28
	30	20.276	6.57	4.62	2.18	2.18	83.71	1.923
		22.65		5.16	2.18
		22.4007		5.08	2.17
	40	20.7839	6.50	4.39	2.02	2.03	77.9	1.892
		20.4441		4.34	2.03
		20.6386		4.4	2.04

※40、50、60、70℃4个温度级0时间取样均取19℃的数据，均对5个时间数据的回归。

当对数浓度与时间呈线性相关时，即LogC=-kt/2.303+LogCo反应为一级反应。根据b值得出各温度下的速度常数k值。然后根据Arrhenius公式，计算出贮存条件下的速度常数k。结果见表2。

表2  经典恒温实验苦杏仁苷速度常数与温度的关系

T/℃	1/T×103	k/h-1	Logk	回归结果
40	3.195	2.101×10-3	-3.678	r=-0.9989 a=13.19 b=-5286
50 60	3.096 3.003	5.988×10-3 21.30×10-3	-3.222 -2.672
70	2.915	60.80×10-3	-2.216

LogK对1/T进行回归，求出回归方程：

Logk=-E/(2.303RT)+LogA(E为活化能，R为摩尔气体常数8.314，A为频率因子)。

2.3 留样观察

2.3.1 方法与结果  取供试品18份，每份约50g，用普通塑袋包装封口，置恒温箱中20℃保存，分别于1、2、3、6、12、24个月后测定样品的含水量和苦杏仁苷的含量。留样观察结果与按速度常数计算的推算值比较见表3。

表3  留样观察实验结果

时间/月	取样量/g	水分/%	AgNO3 /mL	苦杏仁苷含量/%
				含量	平均值	干品	推算值
0	20.8075	6.90	5.60	2.58	2.60	2.79	2.79
	20.5173		5.60	2.61
	20.6993		5.62	2.60
1	20.5520	6.90	5.52	2.57	2.57	2.76	2.76
	21.3355		5.72	2.57
	20.9492		5.62	2.57
2	20.0774	7.10	5.32	2.54	2.53	2.73	2.73
	20.5371		5.43	2.53
	20.7935		5.50	2.53
3	21.2351	7.15	5.55	2.50	2.50	2.70	2.70
	23.3172		6.11	2.51
	20.0926		5.26	2.50
6	20.0716	7.00	5.10	2.43	2.43	2.62	2.62
	21.5842		5.49	2.43
	20.5299		5.22	2.43

 

2.3.2 药材初始、恒温实验和留样观察后的部分性状描述  初始表面黄棕色；去除种皮后，乳白色，质地较脆。经典恒温实验后，表面黄褐色，去除种皮后，深黄色，

质地软。在留样观察期及至二年间，表面深黄棕色，去除种皮后，淡黄色，质地较软。

3 结论

郁李仁于20℃贮存，其速度常数为K_20℃=1.409×10^-5，通过留样观察验证，推算值与0～24个月苦杏仁苷含量二者基本相近，说明含量与贮存时间关系呈一级反应规律。所得速度常数K_20℃=1.409×10^-5比较可靠。即在20℃下贮存，该批供试品苦杏仁苷下降10%所需的时间为t=0.1054/k=311d，苦杏仁苷含量下降至《中国药典》规定的最低浓度1.5%所需的时间为1832d，即本批产品的有效期为1832d。

4 讨论

4.1 需区别的问题  郁李仁同时具有润肠通便、下气利水之功，下气利水的成分为苦杏仁苷，润肠通便的成分为脂肪油，选择不同的有效成分作研究，所得有效期的结果会不一样。注：药典规定郁李仁置阴凉干燥处（20℃以下）贮存，当温度为20℃时，K_20℃=1.409×10^-5。

4.2 初始、恒温、留样观察后的部分性状变化  可能与恒温、时间过长等因素有关。

4.3 建议  中药生产企业在中药材的包装袋上标明药材的生产时间和有效成分的含量，便于商家和使用单位推算其有效期。

 

（张志国,曹臣,周新蓓,黄大香,欧阳荣,陈兴. 郁李仁有效期研究[J]. 中国现代药物应用,2007,(07):1-3. ）